在LC（液相色譜）系統(tǒng)中，“體積”是一個(gè)重要的概念，它涉及多個(gè)方面，包括但不限于柱體積、死體積、駐留體積和延遲體積等。以下是需要知道的LC系統(tǒng)“體積”知識(shí)：
### 1. 柱體積（Column Volume）
* **定義**：柱體積是指液相色譜柱內(nèi)填料的總體積，它決定了色譜柱的容量和分離能力。
* **計(jì)算方法**：通常可以通過(guò)公式V=π×r×r×h來(lái)計(jì)算，其中r為色譜柱的半徑，h為色譜柱的長(zhǎng)度（即圓柱體的高）。但需要注意的是，對(duì)于某些品牌的色譜柱，如安捷倫，其柱體積一般是色譜柱的柱管體積乘以65%或60%來(lái)計(jì)算，這取決于填料的緊密堆積程度和實(shí)際使用情況。
* **重要性**：柱體積的大小直接影響色譜柱的分離效率和樣品負(fù)載量。較大的柱體積可以提供更好的分離效果和更高的樣品負(fù)載量，但也會(huì)增加分析時(shí)間和溶劑消耗。
### 2. 死體積（Dead Volume, V0）
* **定義**：死體積是指從進(jìn)樣點(diǎn)到檢測(cè)器之間，不參與色譜分離過(guò)程的體積。它主要包括進(jìn)樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙（被流動(dòng)相占據(jù)，Vm）、柱出口管路體積和檢測(cè)器流動(dòng)池體積。
* **重要性**：死體積過(guò)大會(huì)導(dǎo)致色譜峰展寬和分離度降低，從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，在液相色譜系統(tǒng)設(shè)計(jì)中，應(yīng)盡量減少死體積。
* **測(cè)定方法**：系統(tǒng)死體積一般通過(guò)進(jìn)樣基本不保留的小分子（如尿嘧啶、丙酮和硫脲）來(lái)測(cè)定。死時(shí)間（即樣品通過(guò)死體積所需的時(shí)間）與死體積相關(guān)，可以用死體積除以流速來(lái)測(cè)定。
### 3. 駐留體積（Hold-Up Volume）
* **定義**：駐留體積是指溶劑首次混合點(diǎn)（通常在液相色譜儀的混合腔內(nèi)或比例閥中）與液相色譜柱頭之間的體積。
* **重要性**：在梯度洗脫或等度洗脫的溶劑組成改變時(shí)，駐留體積對(duì)于使色譜柱在盡可能短的時(shí)間內(nèi)完成流動(dòng)相組成的變化非常重要。它確保了樣品和梯度能夠同時(shí)到達(dá)柱進(jìn)口，從而提高了分析的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
### 4. 延遲體積（Delay Volume）
* **定義**：延遲體積與駐留體積在概念上相似，都涉及到溶劑混合點(diǎn)到色譜柱頭的體積。但延遲體積更側(cè)重于描述在溶劑組成變化時(shí)，系統(tǒng)需要一段時(shí)間來(lái)穩(wěn)定流動(dòng)相組成的現(xiàn)象。
* **重要性**：在梯度洗脫過(guò)程中，延遲體積的大小會(huì)影響色譜峰的形狀和分離度。較大的延遲體積可能導(dǎo)致色譜峰展寬和分離度降低。
綜上所述，LC系統(tǒng)中的“體積”知識(shí)涉及多個(gè)方面，包括柱體積、死體積、駐留體積和延遲體積等。了解這些概念及其重要性對(duì)于優(yōu)化液相色譜分析條件、提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性具有重要意義。
