色譜柱的清洗和再生的幾個方法
通常情況下，
對于常用的反相色譜柱出現了嚴重的柱效降低需要考慮再生時，建議大家用以下流程來進行沖洗：
一、沖洗流程
- 20倍柱體積水：乙腈= 95%：5% （用于移除系統中緩沖鹽，可根據常用緩沖鹽濃度調整比例）
- 20倍柱體積 乙腈
- 5倍柱體積 異丙醇
- 20倍柱體積 正己烷
- 20倍柱體積 乙腈。20倍柱體積 水：乙腈=95%：5% （可與步驟1保持相同的比例）
- 用所需的流動相比例重新平衡色譜柱
實際上在色譜柱沖洗時，
很多實驗室習慣用沖洗時間來評價是不是達到我們想要的效果。
例如某位師傅告訴你把這個柱子沖半個小時就可以了。
然而色譜柱的沖洗應該使用沖洗的溶劑體積來評價沖洗效果。
例如這次提到的20倍柱體積的乙腈沖洗色譜柱是指什么呢？
其實柱體積需要按照你使用的色譜柱的內徑和柱長來計算。
通過公式就很容易算出柱體積了，
例如一根4.6mm內徑，150 mm柱長的色譜柱柱體積為：
如果要用20倍柱體積的乙腈沖洗色譜柱就需要約34mL的乙腈，假設你的柱流量是1mL/min，那就要用乙腈沖洗34分鐘。
當柱流量是1.5 mL/min時就需要用乙腈沖洗約23分鐘。
沖洗色譜柱時，色譜柱的尾端不要接檢測器，接一個可以收納廢液的容器就行了。
為了應對不同類型的分析項目，實驗室里常常會配置三種柱子：
一根弱極性柱，一根中等極性柱，和一根強極性柱。
